Rosario to Vampire berlatar belakang di Akademi Youkai yang merpakan sekolah asrama yang kelihatannya normal, kecuali murid-muridnya adalah monster yang belajar hidup berdampingan dengan manusia. Semua siswa hadir dalam bentuk manusia dan mengambil mata pelajaran akademis normal, seperti sastra, gym, bahasa asing, dan matematika. Namun, ada satu aturan yang sangat penting di Akademi Youkai itu, bila ada manusia asli yang masuk kedalam area sekolah harus segera di bunu! :takuts :takuts
Tsukune Aono sebetulnya remaja biasa yang gagal masuk ke SMA karena nila-nilainya yang tidak mencukupi. dan akhirnya orang tuanya mendaftarkan dirinya ke Akademi Youkai sebagai upaya terakhir untuk mendapatkan pendidikannya. Seiring Tsukune tanpa sadar memasuki dunia baru ini, dia memiliki pengalaman bermain dengan gadis paling menarik di kampus, Moka Akashiya. Memutuskan untuk tinggal di alam yang berbahaya untuk menjalin hubungan lebih jauh dengan Moka, dia tidak menyadari bahwa di balik kecantikannya ada monster yang menakutkan dia seorang vampir.
